怎么樣的ATCC細(xì)胞株才能稱得上好的

　　一個(gè)好的ATCC細(xì)胞株有多方面要求：
　　1. 產(chǎn)量高，高的產(chǎn)量直接降低固定投資和單次生產(chǎn)成本。
　　2. 產(chǎn)品質(zhì)量符合要求。產(chǎn)品質(zhì)量影響藥效和安全性。
　　3. 穩(wěn)定性。產(chǎn)量和質(zhì)量在生產(chǎn)傳代過程中不應(yīng)有大的改變。一般認(rèn)為在60-90PDL產(chǎn)量變化不超過30%是可以接受的。
　　4. 與生產(chǎn)過程的相容性。細(xì)胞株需要適合大規(guī)模生產(chǎn)放大。
　　5. 合規(guī)。ATCC細(xì)胞株的構(gòu)建過程應(yīng)避免接觸或使用動(dòng)物來源成分或其它可能影響安全性的成分， 保證單克隆性（clonality）以及整個(gè)過程的實(shí)驗(yàn)記錄完整。
　　ATCC細(xì)胞株無菌操作注意事項(xiàng)
　　1.操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。
　　2.點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。
　　3.操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會。
　　4.不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。
　　5.瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。
　　6.吸溶液的吸管等不能混用。
　　ATCC細(xì)胞株的細(xì)胞處理：
　　1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)隔夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)隔夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
　　2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
　　對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
　　方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
　　方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
　　3）ATCC細(xì)胞株的細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。