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      • 2016

        8-9

        ATCC細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。原代培養物經傳代成功后即為細胞系(cellline),由原先存在于原代培養物中的細胞世系所組成。計穩定株構建實驗需要考慮的因素有哪些ATCC細胞株穩定整合試驗中的幾個關鍵因素:1),外源插入片段的拷貝數。多數情況下,低拷貝甚至是單拷貝可以減少人為實驗因素的干擾。2),整合的幾率,這不僅決定了穩定株篩選的難易程度,而且還可以幫助人們更容易得到混合穩定株。...

      • 2016

        8-8

        一:自我中心的人,將困于人生zui大的陷阱人人都有一個“自我”——我的身體,我的思想感情,我的財產,名譽,地位等等。但是,如果你是一個聰明的人,就應該多替他人著想,因為沒有他人,也就沒有自己。“后其身而身先,外其身而自存”,“我”字強調得過分,就會變成二:過分在意別人的眼光,將喪失自我每個人都是*的,可是許多人偏偏按照別人的眼光和說法生活,同寓言中那個邯鄲學步的人一樣,這種人將迷失自我,個性及其所能帶來的一切。本色zui美,“讓別人說去吧,走你自己的路!”三:嗜欲深者天機淺玩...

      • 2016

        7-6

        ATCC菌種就是標準菌株,每種已經定名的細菌都會有一個模式菌株,一般就是該種zui早發現的那株菌株,用來作為和其他細菌之間比較的對照物。新種鑒定的時候作為參比的實驗菌株就必須是標準菌株。ATCC菌種如何篩選分離?ATCC菌種篩選工業發酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩,挑選具有某種能力的有用菌種。ATCC菌種分離首先是從土壤或腐生植物中收集含菌樣品,用無菌水稀釋后,涂布于置有適宜細菌、放線菌或霉菌生長的瓊脂培養基平皿上,并將其倒置于恒溫箱中,培養一定時間,平皿上...

      • 2016

        6-30

        HCCLM3人高轉移肝癌細胞資料細胞株名稱:HCCLM3人高轉移肝癌細胞種屬:人組織來源:肝癌,肺轉移生長特性:貼壁生長形態特征:上皮樣,胞質內有顆粒描述:用人肝癌細胞株MHCC97-H接種裸鼠,進行3次肺轉移篩選,取肺轉移瘤建成皮下接種后高度自發性肺轉移的肝癌細胞系。支原體檢測:陰性*培養基:DMEM+10%胎牛血清(gibco貨號10099141)培養條件:37.0Ccarbondioxide(CO2),5%以下是我公司肝癌細胞的目錄Hep3B2.1-7人肝癌細胞HepG...

      • 2016

        6-27

        細胞培養常用培養基及基本特性1、RPMI-1640MediumRPMI-1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞,雜交瘤細胞的培養,是目前應用十分廣泛的培養基。主要用于懸浮細胞培養。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。2、MinimumEssentialMedium(MEM)也稱zui低必需培養基,它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單,...

      • 2016

        6-22

        注意:冷凍保存的細胞非常脆弱。將小瓶置于37°C水浴融化細胞,然后盡快移入培養物(液)中,盡量減少操作。準備1.準備纖維連接蛋白包被的培養瓶(2μg/cm2,推薦用T-75的培養瓶)。向培養瓶中加入10ml無菌Dulbecco's磷酸鹽緩沖液(DPBS),然后加入150μl纖維連接蛋白原液(1mg/ml,Sigmacat.no.F1141)。將培養瓶放入培養箱中孵育。2.準備*培養基:用70%的酒精消毒培養基和添加物的外表面,然后放到無菌的地方。在無菌環境下打開每一個添加物管...

      • 2016

        6-20

        凍存和復蘇的原則:慢凍快融當細胞冷到零度以下,可以產生以下變化:細胞器脫水,細胞中可溶性物質濃度升高,并在細胞內形成冰晶。如果緩慢冷凍,可使細胞逐步脫水,細胞內不致產生大的冰晶;相反,結晶就大,大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結晶。慢凍程序1.標準程序:采用細胞凍存器當溫度在-25℃以上時,1~2℃/min;當溫度達-25℃以下時,5~10℃/min;當溫度達-100℃時,可迅速放入液氮中。2.簡易程序:將冷凍管(...

      • 2016

        6-16

        細胞支原體污染的熒光檢測方法DNA螢光染色法·原理︰利用螢光染劑(bisbenzimide,Hoechst33258)偵測支原體污染。此染劑會結合到DNA之Adenosine-Thymidine(A-T)rich區域,因為支原體之DNA中A-T含量占多數(55~80%),所以可將其染色而偵測。被支原體污染之細胞經染色后,在細胞核外與細胞周圍可看到許多大小均一之螢光小點,即為支原體之DNA,證明有支原體之污染。·特點︰簡單、經濟與靈敏,廣泛使用,可作為例行之偵測步驟。可以偵測不...

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